Post by jone447 on Aug 2, 2023 1:03:24 GMT -5
级分进行 VLDL/IDL/LDL (ApoB48/100) 以及 HDL (ApoA1) 标记物的蛋白质印迹分析。d , e 35 S 计数来自 WT 和 Tial1 LKO 动物原代小鼠肝细胞中 TIAL1 靶标和非靶标（对照、HUR、APOE）的代谢标记和免疫沉淀（每组 n = 4）（d）及其培养基（e）。对感染 Ad-GFP 或 Ad-Tial1 的原代小鼠肝细胞（ 每组n = 4）（ f）和 Tial1 LKO 动物
的培养基（g ）中的 TIAL1 靶标免疫沉淀的35 S 计数。数据亚洲手机号码列表以平均值±标准差表示。通过双尾学生t检验评估统计显着性。源数据作为源数据文件提供。 全尺寸图像 ViP-CLIP 将 ApoB 转录物识别为 TIAL1 的主要靶标，主要结合在其 CDS 和 3'UTR 处（补充图 5a）。因此，我们测量到循环APOB100水平下降，主要是IDL/LDL，而APOB48、APOA1和APOE保持不变（图 5c和补充图 5b）。 T
IAL1 结合位点位于 ApoB 的 9 kb 长 3'UTR 中，由于其长度，禁止使用荧光素酶测定来探索功能机制。因此，我们用L-[35S]-蛋氨酸/半胱氨酸在原代肝细胞中进行脉冲追踪实验，以标记新翻译的蛋白质。对放射性标记的靶蛋白进行免疫沉淀后，我们通过闪烁计数定量新生蛋白的翻译率。该分析揭示了来自 Tial1 LKO 和对照小鼠的细胞和培养基中 APOB 闪烁计数减少，表明 TIAL1 调节 ApoB 翻译（